产品货号：
GS2307
中文名称：
2×Taq PCR Mix(不含染料)
英文名称：
2×Taq PCR Master Mix(without Dye)
产品规格：
1mL|5mL
发货周期：
1～3天
产品价格：
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本制品是一种即用型的溶液，包含Taq DNA聚合酶、dNTP、MgCl2、PCR buffer和PCR反应稳定剂。优化的2×Taq PCR Mix能从λDNA中扩增长达5kb的目的片段。用户只需加入模板、引物和水即可建立PCR反映。
2×Taq PCR Mix在反应体系中提供终浓度为1.5mM的MgCl2。如果需要更高浓度的Mg2+，您可使用25mMMg2+来调节PCR体系终浓度，以期获得理想的PCR产物。
- 即用型，操作方便快捷，节省时间。
- 加入特殊的稳定剂，37℃高温16小时或反复冻融20次对PCR扩增效率均无明显影响。
- 操作步骤少，减少交叉污染。
- 通常适用于扩增5kb以下的片段。
| 组分 | 1mL | 5mL |
| 2×Taq PCR Mix(不含染料) | 1 | 5×1mL |
| Sterilized ddH2O | 1mL | 5×1mL |
| MgCl2 (25mM) | 0.5mL | 1mL |
保存：-20℃
- 根据下列条件来优化模板浓度。
基因组DNA 1～10μg/mL 质粒DNA 0.1～1μg/mL - 优化引物浓度：0.2～0.5μM的引物浓度适用于大多数PCR扩增反应。
- 试剂于冰上溶解。
- 根据下表准备反应体系：
成分 用量 终浓度 2×Taq PCR Mix(不含染料) 25μL 1× DNA template 1μL 参考步骤1 Primer F(10μM) 2μL 0.4μM Primer R(10μM) 2μL 0.4μM Sterilized ddH2O 至50μL - - 将反应管置于离心机中离心30~60 s。
- 若使用的PCR仪没有热盖功能请用矿物油覆盖反应液。
- 大多数PCR反应可使用下列循环程序：
步骤 温度 时间 循环数 预变性 94℃ 4min 1 变性 94℃ 30s 30～35 退火 45～68℃ 30s 延伸 72℃ 1kb/min 终延伸 72℃ 10min 1
| 问题 | 分析 |
| 产物少或没有 | 模板浓度过低；实验样品DNA损伤或降解。 |
| 引物设计不完善。 | |
| PCR条件未优化；退火温度过低或过高；延伸时间太短，循环次数太少。 | |
| 引物浓度过低；Mg2+浓度未优化。 | |
| 模板质量太差。 | |
| 产物为多条带 | 引物设计不完善。 |
| 引物浓度未优化或引物降解。 | |
| 退火温度过低。 | |
| PCR循环条件未优化。 | |
| 产物有污染 | 模板用量过多。 |
| Mg2+浓度未优化。 | |
| PCR中的长片段来源于长的基因组DNA。 | |
| 携带污染。 | |
| 引物设计完善。 |
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